認識鉤端螺旋體(三)~診斷-台灣基因-新浪部落 @ 股神丫玉

認識鉤端螺旋體(三)~診斷

如何診斷鉤端螺旋體

血液學檢查
典型之鉤端螺旋體病病患血液檢查可見白血球減少，隨病程推進白血球的數量會增加而轉為有白血球增多症。血液包括白血球過多症、淋巴球減少和單核球升高。由於菌血症引起之血管內凝血，血小板缺乏症亦是主要徵狀之一。由於鉤端螺旋體造成病犬肝、腎功能衰竭，典型的血液非特異性生化檢查包括肝功能指數(ALT、AST、ALP)和腎功能指數(BUN、creatinine)上升；多數的病犬會有黃疸之臨床症狀，尤其是血清型icterohaemorrhagiae感染，約有70％以上的病犬因肝功能區域之肝細胞壞死和微膽管阻塞造成膽汁鬱積而出現黃疸症狀，在血液生化檢查中可測得其totalbilirubin及direct-bilirubin值遠高於正常值。

尿液檢查

由於血液中膽色素(bilirubin)濃度太高，往往會經由尿液來排除部份膽色素，因此在黃疸嚴重之犬隻的尿液檢查中，往往可見到高膽色素尿。尿比重則因腎小管受傷害喪失水分重吸收的能力而低於正常值。另外，由於腎小管遭嚴重損傷，引起炎症反應，在尿渣中可見到多量的紅、白血球和腎小管上皮細菌。

診斷

鉤端螺旋體病之確診必須基於臨床症狀、臨床病理學檢查、細菌學檢查以及血清學檢查等方面之證據。犬隻的急性腎衰竭發生時，我們即可懷疑是鉤端螺旋體病；一旦病犬同時有發熱、白血球數增加、肝功能衰竭等症狀出現，即可初步診斷為鉤端螺旋體病。細菌學檢查的方法是直接以暗視野顯微鏡觀察血液或尿液中之鉤端螺旋體或由二者中分離細菌、增殖後再觀察。倘使血液、尿液中的細菌數目不多，直接觀察幾乎是不可能；若想以鉤端螺旋體培養之方式來確診又非常耗費時間且頗為困難，因此不適合用來做即時的鑑別診斷方法。
microscopic agglutination test，MAT

血清學檢查的方法主要有二種：顯微凝集試驗(microscopic agglutination test，MAT)以及酵素連結免疫吸附法(ELISA)。其中MAT法是檢測抗體力價，目前仍為診斷leptospirosis最為普遍的方式，一般以≧1: 100作為判讀陽性血清之標準，抗體的產生，代表曾經接觸過該抗原，有可能是自然感染或是疫苗注射後刺激產生。一般而言，在疫苗注射後，只會產生少量的抗體(力價約為1: 100 至1: 400)，且通常只維持1-3 個月，但亦有少數犬隻會產生較高的力價(可達1: 3200)，且維持長達6個月以上。為了避免與疫苗注射產生的抗體混淆，檢測時一般會排除近期疫苗注射之病例，並以MAT上昇四倍以上或單次效價大於等於1:800 ，並配合臨床症狀等，作為急性感染之判讀標準。MAT需取急性期的血液(感染一週內)以及恢復期的血液(三~四週)進行病犬體內抗體力價試驗，通常急性期血液抗體力價低(1:100~1:200)，恢復期血液抗體力價較高(1:800~1:1600)；然而，在抗生素投予後，血清抗體力價通常無法如預期升高，而要高度懷疑感染病例靜待2週後採血再行治療，實不符臨床考量。並且血清抗體有時會有延遲上升，造成很多假陰性的現象，且不能在感染初期即測得犬隻是否遭感染，以及無法測出病犬是否仍呈帶原狀態。ELISA檢測血中之IgM及IgG，感染初期會先產生IgM，約在2週後才會有IgG產生，可藉此評估疾病感染之病程。其它抗體檢查法如平板凝集、乳膠凝集（latex agglutination）、間接血球凝集、免疫層析測流法（immunochromatographic lateral flow）等均已有商品化試劑套組可用。

ELISA
Polymerase Chair Reaction，PCR
近年發展出以聚合鏈連鎖反應(Polymerase Chair Reaction，PCR)偵測鉤端螺旋體基因核酸之技術來進行本病之確診，提供了獸醫臨床上一種既快速又敏感，可靠性及準確性又高的診斷方法，即使是血液或尿液中只有很少量之菌體存在，也能夠偵測得到。利用此方法，可以在本病之早期便得到確診，也可以評估避免犬隻轉為慢性帶原狀態之工作是否完成，特別是針對此一重要的人畜共同傳染病，顯得格外的重要。
PS.有關PCR相關文章請參閱本部落格文章